欧洲精品码一区二区三区免费看,人人澡人人透人人爽,日本japanese熟睡人妻,伊人久久大香线蕉AV影院

銷售熱線

19126518388
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當(dāng)前的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > CAT活性的相-抽提分析法

    CAT活性的相-抽提分析法

    發(fā)布時(shí)間: 2021-12-16  點(diǎn)擊次數(shù): 1316次

    材料與儀器

    轉(zhuǎn)染細(xì)胞
    氯霉素 Tris·Cl TMPD 二甲苯
    離心機(jī) 離心管 培養(yǎng)箱

    步驟

    一、來源于哺乳動(dòng)物細(xì)胞

    1.  按“CAT活性的層析分析法"中的步驟1~5的凍融法,制備哺乳動(dòng)物細(xì)胞提取物。如果用胰蛋白酶消化或制細(xì)胞方法來收集細(xì)胞,則將原位裂解法的步驟1至4用以下的步驟2至4代替。

     
    2.  室溫下,300 g 離心5 min,棄去上清。每107細(xì)胞加入1 ml 低滲緩沖液,離心,棄上清。然后每107細(xì)胞加Triton裂解液200 μl。

    二、來源于植物原生質(zhì)體
     
    1.  室溫下,2 000~4 000 g 離心5 min,將植物原生質(zhì)體細(xì)胞收集于1.5 ml 的微量離心管中,棄去上清。

    2.  往細(xì)胞沉淀加50 μl 低滲緩沖液,在旋渦混合器上劇烈振蕩,將離心管置于-70℃ 15 min以上,或置于干冰/乙醇浴中5 min 以凍結(jié)樣品。融解樣品,在室溫下13 000  g 離心2 min,將上清移入一個(gè)干凈管中。

    3.  對(duì)于分析50 μl 細(xì)胞提取液,配置如下CAT分析混合液
    20 μl  0.01 μCi/μl [3H]氯霉素
    5 μl  5 mg/ml 丁酰輔(酶)A
    5 μl  2 mol/l Tris·Cl,pH8.0
    20 μl  H2O
     
    4.  對(duì)每組分析,將50 μl CAT分析混合液加入50 μl 細(xì)胞提取液中。37℃溫育30~90 min。
     
    5.  用200 μl 2:1的TMPD/二甲苯劇烈報(bào)蕩提取乙?;穆让顾兀x心并移出上層液相至一只閃爍瓶中。

    6.  樣品中加3~5 ml 閃爍液,計(jì)數(shù)測(cè)定CAT的活性。


    同實(shí)驗(yàn)其他方法

    CAT活性的層析分析法

    1.  100 mm 培養(yǎng)皿中的轉(zhuǎn)染了CAT表達(dá)質(zhì)粒的貼壁細(xì)胞,用PBS洗兩次,每次5 ml每培養(yǎng)皿加入1 ml TEN溶液。將細(xì)胞置于冰浴5 min。   2.  用橡膠

    原位裂解細(xì)胞的CAT分析法

    1.  60 mm 培養(yǎng)皿中轉(zhuǎn)染了CAT表達(dá)質(zhì)粒的細(xì)胞,用2 ml PBS洗1次。每培養(yǎng)皿加入2 ml 低滲緩沖液,在室溫下溫育2~5 min。 2.  吸去低滲緩沖液,加入400 μl T

    人生長激素的放射免疫分析法

    1.  取轉(zhuǎn)染了hGH表達(dá)質(zhì)粒的哺乳動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)液100~500 μl。 2.  加100 μl 培養(yǎng)液或標(biāo)準(zhǔn)品至12 mm×75 mm 圓底試管中。加入100 μl 125I-

    以上就是本期的內(nèi)容,更多資訊,歡迎關(guān)注安培生物科技有限公司了解更多技術(shù)與產(chǎn)品資訊。


    安培生物科技有限公司介紹:

    安培生物堅(jiān)持為生命科學(xué)研究、活體動(dòng)物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細(xì)胞治療領(lǐng)域客戶,提供*細(xì)胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑;inviCELL™Platelet lysate無動(dòng)物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細(xì)胞擴(kuò)增和生產(chǎn),包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞和多種免疫細(xì)胞系等,為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細(xì)胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務(wù);提供以植物生物為平臺(tái)基因序列全人源化、*的細(xì)胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品;提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對(duì)細(xì)胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領(lǐng)域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù),努力發(fā)展為基因治療、細(xì)胞治療的生物科技企業(yè)。


產(chǎn)品中心 Products
人人爽人人澡人人高潮| 色窝窝无码一区二区三区成人网站| 久久偷看各类wc女厕嘘嘘偷窃| 国产无套内射普通话对白| 色欲人妻aaaaaaaa无码| 极品hd无码国模国产在线观看| 国产麻豆精品一区二区三区 | 亚洲AV无码国产精品色在线看| 无码熟妇av人妻又粗又大| 风韵丰满熟妇啪啪区老熟熟女| 男女又黄又刺激a片免费| 中文在线中文资源| 精品少妇ay一区二区三区| 国产性生交xxxxx免费| 久久精品国产精品亚洲毛片| 国产精品a久久777777| aa片在线观看视频在线播放| 国语熟妇乱人乱a片久久| 性XXXXX大片免费视频| 99精品人妻无码专区在线视频区| 亚洲av无码成人精品区狼人影院| 精品国产一区二区三区四区色欲| 一个人看www在线视频| 亚洲午夜精品久久久久久人妖| 日韩精品一区| 国产在视频线精品视频| 中文字幕精品一区二区精品| 亚洲国产精品成人久久久| 一本色道久久综合狠狠躁| 特黄把女人弄爽又大又粗| 天天躁人人躁人人躁狂躁| 中文字幕爆乳julia女教师| 女女百合av大片在线观看免费| 丰满少妇人妻无码| 国产男女爽爽爽免费视频| 欧洲高清视频在线观看| 亚洲精品尤物av在线观看任我爽| 丰满熟妇乱又伦在线无码视频| 人妻体验按摩调情BD| 亚洲娇小与黑人巨大交| 国内精品久久久人妻中文字幕|